Эпидемиологическая ситуация по ВИЧ-инфекции в России
Сегодня эпидемиологическая ситуация по ВИЧ-инфекции в России напряженная и продолжает ухудшаться. Основной причиной инфицирования продолжает оставаться употребление инъекционных наркотиков, увеличивается число лиц, заразившихся половым путем. У специалистов особую тревогу вызывает обстоятельство, что медицинские работники в большинстве случаев принимают неверные решения по вопросам лабораторной диагностики и профилактики ВИЧ-инфекции.
Патогенетические аспекты ВИЧ-инфекции
Входными воротами для вируса при половом пути заражения служат слизистые оболочки гениталий или прямой кишки, откуда ВИЧ распространяется лимфогенно, поступает в кровоток и различные органы и ткани, поражая при этом в первую очередь клетки лимфоидного ряда. Поликлональная активация В-клеток приводит к гипергаммаглобулинемии и ослаблению их способности продуцировать новые анти-Т-лимфоциты, подвергающиеся воздействию вирусных белков, которые образуются при гибели ВИЧ — инфицированных клеток и вирионов, теряют способность к пролиферации. Инфицирование вирусом макрофагов и моноцитов ослабляет их антиген — представляющую и фагоцитарную функции. Самокупирование острой ретровирусной инфекции сопровождается нарастанием в крови специфических антител до уровня, определяемого доступными методами.
Цели молекулярно-генетических исследований ВИЧ-инфекции
Необходимо установить как факт инфицирования ВИЧ, так и детальный клинический диагноз. В тест-системах 1 поколения в качестве антигена на твердую фазу нанесен инактивированный нагреванием лизат культуры лимфоидных клеток человека, инфицированных ВИЧ-1, они выявляют весь спектр специфических анти-ВИЧ антител и предпочтительны для проведения скрининговых обследований. В тест системах 2 поколения в качестве антигена нанесены отдельные антигены ВИЧ-1 и ВИЧ-2, полученные генно-инженерным способом – рекомбинанатные тест-системы. В тест системах третьего поколения используются синтетические пептиды, которые состоят из отдельных антигенных детерминант ВИЧ-1 и ВИЧ-2. В тест-системах 4 поколения используются комбинированные иммуносорбенты, которые содержат лизатный ВИЧ-1, а также рекомбинантные и пептидные антигены.
Важно понимать, что ложноположительные результаты могут быть получены при обследовании больных хроническими инфекционными, аутоиммунными, а также онкологическими заболеваниями. Сыворотки неинфицированных беременных женщин, пациентов после гемотрансфузий, хронических алкоголиков, также часто проявляются как положительные. Ложноотрицательные результаты бывают обусловлены несоответствием антигенов, нанесенных на твердую фазу и выявляемыми антителами.
Подтверждение результатов исследования
После проведения скринингового теста, все положительные результаты перепроверяют в другой иммуноферментной тест-системе, а затем в более чувствительном тесте — иммуноблоте. Учитывают результаты иммуноблота по выявлению окрашенных полос на диагностических нитроцеллюлозных мембранах. Повышение чувствительности данного метода достигается за счет того, что на твердой фазе представлены все индивидуальные структурные и промежуточные белки ВИЧ. Кроме того, нитроцеллюлозные мембраны лучше фиксируют специфические иммунные комплексы, за счет большей эффективности связывания белков. Сыворотки, подтвержденные с помощью иммуноблота, можно считать истинно положительными, содержащими антитела к ВИЧ. Однако, иммуноблот имеет ряд недостатков. К ним относятся: высокая стоимость одного анализа, трудоемкость исследования, недостаточная стандартизация при учете результатов.
Полимеразная цепная реакция (ПЦР)
При ВИЧ-инфекции с использованием ПЦР определяют провирусную ДНК, геномную РНК и м-РНК вируса. Эффективность данной реакции настолько высока, что можно получить результат, исследуя ДНК одной клетки. Парадоксально, но широкое распространение ПЦР в лабораторной практике лимитировано именно его сверхвысокой чувствительностью. Контаминация реагентов и ДНК при проведении ПЦР является главной причиной получения ложноположительных результатов.
Санитарно-эпидемиологический надзор
Выявление источников инфекции, скрининговое тестирование населения являются одним из направлений государственного санитарно-эпидемиологического надзора, другим аспектом является медицинская профилактика.
К сожалению, применяемые в настоящее время антивирусные препараты отличаются ограниченной эффективностью и выраженной токсичностью, надежды на создание в ближайшем будущем вакцины против ВИЧ также не оправдываются. Определенные успехи принесли методы неспецифической профилактики, однако теоретически действенные рекомендации использования презервативов внедряются трудно и не повсеместно. Разработка и применение методов ранней диагностики ВИЧ-инфекции становится все более актуальной.