История развития методов иммунодиагностики туберкулеза
Долгое время основным диагностическим препаратом оставался туберкулин — простерилизованный фильтрат культуры Mycobacterium tuberculosis, который еще в 1890-х гг. приготовил и применил на практике знаменитый немецкий ученый Роберт Кох. Однако Кох безуспешно пытался применять туберкулин не для диагностики, а для лечения пациентов, и только в 1907 г. Клеменсом Пирке предложено применять туберкулин для диагностической накожной пробы путем скарификации поверхностного слоя эпидермиса. В 1908 г. одновременно Феликсом Менделем и Шарлем Манту предложена внутрикожная туберкулиновая проба. Эта проба остается актуальной и в настоящее время. В 1952 г. Всемирной организацией здравоохранения был утвержден международный стандарт туберкулина, представляющего собой очищенный протеина дериват (purified protein derivative — PPD, ППД). С 1965 г. в России используется туберкулин в модификации М.А. Линниковой (ППД-Л), представляющий собой фильтрат убитых нагреванием культур M. tuberculosis и M. bovis, а проба Манту проводится с 2 туберкулиновыми единицами (ТЕ) ППД-Л в стандартном разведении для внутрикожного применения. Расшифровка генома М. tuberculosis дала возможность идентифицировать 2 специфических антигена (ESAT-6 и CFP-10), которые экспрессируются при размножении микобактерий и отсутствуют в M. bovis. БЦЖ (Bacillus Calmette-Guérin-BCG). Белки ESAT-6 и CFP-10 были использованы при разработке лабораторных диагностических тестов, основанных на высвобождении интерферона (IFN)-γ (Interferon-γ Release Assay — IGRA–тесты). В 2010 г. в России разработана проба с препаратом Диаскинтест®, представляющая собой комплекс рекомбинантных белков CFP-10-ESAT-6 и предназначенная для внутрикожного применения. Проба с препаратом Диаскинтест® является маркером активности туберкулезной инфекции с наибольшим риском заболевания, отличается высокой чувствительностью и специфичностью. Наличие инфекции M. tuberculosis, определяемое на основе персистентного клеточного иммунного ответа на микобактериальные антигены при отсутствии клинических проявлений, получило наименование латентная туберкулезная инфекция (ЛТИ).
Результаты исследования сопоставимости различных методов иммунологической диагностики у взрослых пациентов с ЛТИ
В одномоментном открытом одноцентровом исследовании (n = 100), проведенном специалистами из Москвы и Московской области, приняли участие лица (мужчины и женщины) в возрасте не моложе 18 лет. В 1 группу (n = 50; ЛТИ-НР) вошли условно здоровые лица с ЛТИ и низким риском развития туберкулеза, отрицательным результатом любых зарегистрированных иммунологических тестов, кроме пробы Манту с 2 ТЕ ППД-Л, в течение последних 2 лет; пациенты 2 группы (n = 25; ЛТИ-ВР) — с ЛТИ и высоким риском развития туберкулеза. Критериями включения в группу 2 являлись наличие бытового контакта с больными туберкулезом и положительный иммунологический тест на туберкулез (проба с препаратом Диаскинтест® или IGRA-тесты) в течение последних 2 лет; 3-ю группу я (n = 25; ТОД) составили больные туберкулезом органов дыхания. Критерием включения в группу было отсутствие противотуберкулезной терапии либо ее длительность ≤ 14 дней до начала исследования. Все участники прошли обследование с использованием 6 тестов иммунологической диагностики: in vivo — проба Манту с 2 ТЕ ППД-Л, проба с препаратом Диаскинтест®; in vitro (IGRA-тесты) – T-SPOT®.TB, QuantiFERON®–TB Gold Plus, Standard Е TB–Feron IGRA и ИГРА-ТБ (отечественный диагностический тест, зарегистрированный в 2024г). Результат каждого теста оценивался качественным методом как положительный (туберкулезная инфекция вероятна) и отрицательный (туберкулезная инфекция маловероятна).
Согласно данным проведенного анализа, результаты пробы с препаратом Диаскинтест совпадали с результатами IGRA-тестов (кроме T-SPOT®.TB) в 88-92 % случаев, в то время как согласованность с пробой Манту с 2 ТЕ ППД-Л и T-SPOT®.TB оказалась на уровне 58-64%. Результаты IGRA-тестов имели высокую согласованность между собой (86-88% случаев). Доля положительных результатов в группах ТОД и ЛТИ-ВР и отрицательных — в группе ЛТИ-НР составила 83% для теста ИГРА-ТБ, 80 % — для пробы с препаратом Диаскинтест®, 80% — для теста QuantiFERON®-TB Gold Plus, 78% — для теста Standard E TB-Feron IGRA, 67% — для теста T-SPOT®.TB (p >0,05). Достоверно более низкая результативность показана только при проведении пробы Манту с 2 ТЕ ППД-Л (53 %; p <0,05).
Выводы на основании результатов исследования сопоставимости различных методов иммунологической диагностики у взрослых пациентов с ЛТИ
В заключение, авторы делают вывод, что новый отечественный тест ИГРА-ТБ не уступает зарубежным аналогам и может быть рекомендован в практическом здравоохранении в качестве диагностики ЛТИ у взрослых, в частности в качестве альтернативы пробе с препаратом Диаскинтест®. Представляется принципиально важным продолжить изучение информативности тестов у взрослых пациентов в условиях реальной клинической практики без применения строгих критериев отбора. Иммунологические особенности пациентов, обусловливающие различную чувствительность тестов, нуждаются в дальнейшем изучении.